2020 年 7 月 21 日国务院应对新冠病毒肺炎疫情联防联控机制医疗救治组发布了《新冠病毒核酸筛查稀释混样检测技术指引》

  新型冠状病毒核酸筛查稀释混样技术（以下简称稀释混样）仅适用于大人群样本的筛查，稀释混样检测结果不作为最终确诊依据。在人群总体阳性率较低（低于 0.1%）时更为适宜。以下人群不建议采用稀释混样检测：

  （一）重点区域人群（近期有疫情发生的小区含确定诊出的病例和无症状感染的人、老旧小区、人口密集小区、流动人口聚集区和近期离省外出人群）、其他不适合稀释混样检测的人群；

  1.咽拭子采样方法。被采集人员头部微仰，采样者将拭子越过舌根，在被采集者两侧咽扁桃体稍微用力来回擦拭至少 3 次，将拭子头浸入含 1～3 mL病毒保存液（也可使用等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液）的管中，尾部弃去，旋紧管盖。

  2.样本混合。将采集的数个样本（原则上不超过 5 个）各取 200 uL 进行充分混合，形成混合待检样本。

  2020 年 8 月 17 日国务院应对新冠病毒肺炎疫情联防联控机制医疗救治组发布了《新冠病毒核酸 10 合 1 混采检测技术规范》

  10 合 1 混采检测技术规范从样本采集耗材规格、采集地点要求、采集流程、标本送检、实验室接收、标本检测与质量控制、检验结果处理、检测后样本处理、技术人员基础要求、生物安全防护等十个方面详细规定了相关的技术细节。

  管帽和管体应当为聚丙烯材质，螺旋口可密封，松紧适度。管体透明，可视度好。试管外径（14.8±0.2）mm×（100.5±0.4）mm, 管帽外径（15.8±0.15）mm，高度（12.5±0.5）mm。容量企业定标 10 mL，内含 6 mL 胍盐或其他有效病毒灭活剂的保存液。保存液应当带有易于观察、辨识的颜色（如粉红色），并保持一定的流动性，方便取样。

  宜选用聚酯、尼龙等非棉质、非藻酸钙材质的拭子，且柄部为非木质材料。折断点位于距拭子头顶端 3 cm 左右，易于折断。

  国务院联防联控机制医疗救治组积极组织专业机构和专家论证，研究提出进一步提升核酸检验测试效率的技术方法。经开展临床真实样本验证，在确保核酸检验测试质量的基础上，决定稳步实施 20 合 1混采检测技术，并组织制定了《新冠病毒核酸 20 合 1 混采检测技术规范》。

  20 合 1 混采检测可大幅度提高检测效率，更加适用于大规模人群核酸筛查工作。与 10 合 1 混采检测技术相比，主要是在采样管方面做出调整。

  共分为 10 个部分，最重要的包含：样本采集耗材规格、采集地点要求、采集流程、标本送检、实验室接收、标本检测与质量控制、检验结果处理、检测后样本处理、技术人员基础要求、生物安全防护等。

  （一）病毒采集管。管帽和管体应当为聚丙烯材质，螺旋口可密封，松紧适度。管体透明，可视度好。采集管高度（含管帽）（100±5）mm，容量企业定标 20 ~ 30 mL，内含 11 ~ 12 mL 胍盐或其他有效病毒灭活剂的保存液。保存液应当带有易于观察、辨识的颜色（如粉红色），并保持一定的流动性，方便取样。

  （二）采集拭子。宜选用聚酯、尼龙等非棉质、非藻酸钙材质的拭子，且柄部为非木质材料。折断点位于距拭子头顶端 3 cm 左右，易于折断。

  1.登记流程。工作人员在采集前分配 20 个受检者为一组，采集前收集并登记受检者有关信息（包括姓名、性别、身份证号、联系方式、采集地点、采集日期和时间），按照组别进行采集管编号。因 20 人相对较多，为避免不同组人员弄混，采样时，可采用 2 米线将下一组等候人员与正在采集的一组人员严格分隔开来，该组人员采完后，下一组人员才能有序进入采样区。

  2.登记要求。推荐使用身份证读卡器、二维码条码等信息化手段关联受检者信息，提高信息读取效率和准确性。

  在这个前提下，混样的决策取决于流行率或者称为阳性率（P）和混样数量（k）。如果我们只进行 2 步的检测，即第一步检测混样组，检测为阳性的组进行第二步检测，第二步将阳性组样品逐一进行检测。

  1% 阳性率的情况下，20 混 1 检测。如果有 100 个样品，分为 5 组，第一轮检测结果为 4 组阴性和 1 组阳性，阳性组再进行第二轮逐一检测，检测结果为 19 份阴性和 1 份阳性（或者第二轮检测时只检测 19 份样品即可得到最终结果）。在这样的前提下我们如果不混样有必要进行 100 次检测，混样后只需进行 25 次检测，节省了 75% 的检测量。(少拧的盖子不计其数~)

  混样效能计算公式：首先混样的结果中只有阴性或阳性，每次试验都是相互独立的随机事件。

  预期每个样品的检测次数E（x）越低，代表着混样检测越划算，1-E（X）则表示检测量减少的比例。

  混样检测的前提是预期阳性率。当阳性率在 1% 时，最佳混样数量是 11 混 1，当阳性率是 5% 时最佳混样数量是 5 混 1。

  当阳性率为 0.1% 时，根据计算，理论上 100 混 1 仍然是可行的，但是这个公式的前提是不论多少混 1，只要混样中有 1 个阳性都能检出。

  在现实当中，混样检测之前除了需要先预估阳性率，并且要考虑检测系统的灵敏度，以及对混样会造成的漏检（假阴性）风险进行评估。

  《新冠病毒核酸 20 合 1 混采检测技术规范》的出台，对新冠病毒核酸检验测试的灵敏度又提高了要求，500 拷贝/毫升的最低检测限的标准可能也需要更新了，很多大体积提取试剂和高灵敏度的扩增试剂厂家已经摩拳擦掌了。