因为个体差异，不同人之间的耐受性、既往疾病情况不同，会对采样造成一定的影响。所以，病毒核酸检验测试需要做几次，还要根据众多综合影响因素来判断。

  此前，北京青年报记者通过梳理一些确定诊出的病例行动轨迹发现，有数十人曾多次核算检验测试为阴性。90个病例中一半以上曾至少3次核算检验测试阴性，还有4次、5次，最多的6次。大连一位新冠确定诊出的病例11次核算检验测试才显出阳性。

  为了应对新冠疫情，北京大兴区、河北石家庄、廊坊固安县等地区进行了多轮核算检验测试。

  本文转载自科学加客户端，原文首发于2021年1月15日，原标题为《河北新增90病例中超一半曾多次阴性，核算检验测试多少次才能放心？》。

  11次核酸检测才显出阳性，难道这个能让新冠病毒“现形”的技术真的失灵了？当然不是！

  中华医学会感染病学分会主任委员、北京大学第一医院感染疾病科主任王贵强在接受各个媒体采访时表示，核算检验测试本身的稳定性是好的，出现所谓检不出或者假阴性、假阳性的情况，还在于任何检测的新方法都有一个敏感性的问题。由于新冠病毒的核酸检验测试从原理到实践上存在一定的差异，就有“测不准”的可能性。

  北京市大兴区人民医院呼吸科主任医师张永祥和记者说，新冠病毒与SARS冠状病毒一样，是由RNA（核糖核酸）、蛋白等组成的，最外一层由脂质和糖蛋白组成包膜外衣。RNA很容易降解（细胞内某些单独的RNA片段和链的破坏），蛋白衣壳会将RNA包裹在其中，与包膜外衣一同保护RNA。新冠病毒会通过特定细胞表面的受体入侵细胞造成感染，并且利用被感染者的细胞进行复制增殖。

  因此，医务工作者能够最终靠采集人的特定部位的细胞标本，检测其中是否含有病毒RNA，从而确认机体是否受到感染。

  而RNA的核酸是由4种不同碱基排列而成的，如果要保证四种碱基两两排列，那么便有8种形式，相连的4个位点的碱基就有256种排列方式，组成RNA的碱基越多，排列的组合越复杂，而新冠病毒有几万个碱基。病毒的核酸就会像我们的身份证一样，是它独一无二的身份标识。核酸检验测试就为了识别出新冠病毒的“身份”。

  以目前常用的PT-PCR技术为例，假设某人已患新冠肺炎，有必要进行检查，医护人员会从他身上采集带有病毒的细胞，运送到实验室，将其充分灭活，使其原本的结构被破坏，核酸暴露，再使用试剂中的探针，查看它能否与RNA的某些关键部位发生高度的匹配，每匹配成功一次，就会产生相应的荧光信号，表明“基因身份证”得到了识别，PCR检测仪会实时记录荧光信号值。经反复检查荧光强度慢慢的升高，检测软件上就会出现一条上升的曲线，表明检测呈阳性，证明该样本存在新冠病毒的RNA。

  张永祥谈到，病毒核酸检验测试是确诊阳性的必要条件之一。从技术层面来说，核算检验测试是一个多环节的工作流程，整个检测包括采样、运输、灭活、核酸提取、PCR反应等，任何一个环节的错误操作或试剂、设备出现问题，都可能会引起样本“假阴性”或者“假阳性”。

  在核算检验测试的实际操作中，如果核酸检测试剂盒、采样管存在质量上的问题，会导致从根本上不能准确测定；另外，病毒保存液提取量过小、加入到PCR体系中检测的核酸洗脱液体积过低，会导致核酸存在丢失的风险，使结果产生偏差而偏离真实值。

  目前的新冠病毒核酸检验测试需要取咽拭子或鼻咽拭子，正确的咽拭子采集要同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，鼻咽拭子采集要轻轻插入鼻道内，在鼻腭处停留片刻后缓慢转动退出。而这两处的取材，在过去的临床实践中很少开展，所以采样人员基本都是从2020年才开始集中培训并操作，人员培训不到位势必会造成操作不统一，这也可能会引起同一个人每次的核酸检验测试结果不一致。

  有研究指出呼吸道标本检出率最高的是支气管肺泡灌洗液，其次是肺组织、抽吸痰或鼻咽吸取物，然后是鼻咽拭子或咽拭子。因此，鼻咽拭子或咽拭子检测虽方便快捷，但并不是准确率最高的方式。如果患者感染已到了病程中后期，病毒则集中在下呼吸道，鼻咽部已不是主要感染区域，鼻咽拭子或咽拭子经反复检测也可能“测不准”。

  张永祥说：“不同的人，体内的病毒载量可能不同。如果体内病毒载量特别高的话，能查出来的时间就会短一些。若是病毒载量很低的话，可能就会比较难检测出结果。”

  其实，也不难想象，同一批进行仔细的检测的样本，在检测试验的扩增阶段，它们的基因序列都是呈相同的倍比扩增的。对于携带病毒基因序列多的样本来说，扩增结束，病毒基因会更多，在用试剂盒检测时，可能会更接近试剂盒的最低检测限，更容易测出。而对于病毒含量本来就少的样本来说，虽然也经过相同倍比的扩增，但是在用试剂盒检测时，扩增出的病毒基因也远远少于携带病毒基因序列多的样本。也就是说，只有通过多次病毒核酸检验测试，才能抓住携带病毒核酸的“漏网之鱼”。

  曾有患者连续进行了5次核算检验测试，仅有1次为阳性，其余均为阴性。医生查阅病史得知，该患者是一位人类免疫缺陷病毒（HIV）携带者，长期服用抗HIV的药物，体内新冠病毒的载量可能因药物作用低于检测下限，导致其核酸检验测试反复阴性。

  另外，实验室检测工作员操作时，发生标本间交叉污染或实验室遗留污染等，也会导致结果不准确。对于一个规范的临床实验室，有严格的质控策略，一般可有很大成效避免病毒核酸检验测试测不出、假阳性结果。还有病情变化、患者病情进展快慢不同、采样时机及时间间隔等因素，也会影响到检测结果。

  记者采访专家时了解到，由于核算检验测试影响因素众多，1~2次甚至连续3次的核酸阴性结果，也并不能够确保受检测者不携带新冠病毒。但对于非密切接触者，核酸检验测试结果更像是“通行证”——保证自身能进行一定的群体聚集活动，所以一般按需检测即可，另外同时也要注意做好防护。

  所以对于一般的人来讲，不需要反复检测。对于重点对象需要反复检测，比如密切接触者，刚开始可能排出病毒量不多，咽拭子有可能没检验测试到，但是不代表体内没有病毒。所以，我们要多次进行仔细的检测，单次核酸阴性对重点对象来说，其实是不保险的。

  对于疑似病例或密切接触者，在未解除患病风险时，在大多数情况下要多次检测。根据第七版新冠病毒诊疗方案，还需通过血常规检验测试、肺部CT的毛玻璃状病变等筛查，还可能进行新冠特异性抗体（IgG和IgM）等检测。

  此外，因为个体差异，不同人之间的耐受性、既往疾病情况不同，会对采样造成一定的影响。所以，病毒核酸检验测试需要做几次，还要根据众多综合影响因素来判断。

  3.里进,叶光明,陈良君,等.新冠病毒核酸检验测试假阴性结果缘由分析及对策[J].中华检验医学杂志,2020,43(03):221-225.