无红细胞的单细胞悬浮液制备的脾细胞，刀豆蛋白A爆破或PBLபைடு நூலகம்FACS缓冲液（PBS中，用1％牛血清白蛋白和0.05％NaN的3）和细胞进行染色，在黑私自在冰上20分钟，进行外表的表达CD8α（APC-CY7），CD4（PerCP CY5.5），CD3ε（FITC），CD137（FITC），CD19（PerCP-Cy5.5符号），或NK1.1（PE-CY7所有的抗体，BD生物科学，圣地亚哥，CA）。细胞内染色，细胞透性运用的Cytofix / Cytoperm试剂盒，依据生产商的计划，和细胞内细胞因子运用肿瘤坏死因子-α，肿瘤坏死因子-α或IFN-γ（PR-700，BD生物科学）。四聚体剖析，进行温育的细胞悬浮液与H2-K b / TRP-2的180-188四聚体（SVYDFFVWL，APC-符号，Sanquin，）或H2-K b / OVA 257-264四聚体，什物礼品CM 25分钟，在37°C和5％CO 2之前，随后的外表抗体染色。外表MHC-I类检测是由孵化IFN-γ引物和未曝光B16.F10细胞与小鼠抗鼠MHC I类抗体，圣迭戈，随后孵育检测的山羊抗小鼠IgG2a抗体，丈量样品在FACS广东II流式细胞仪（Beckton Dickinson公司，圣迭戈，CA）。运用FlowJo软件的数据来进行了剖析。