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活死细胞染色试剂【荧光染料】
发表时间: 2025-03-19 03:41:26 作者: 稀释液
细胞增殖和细胞逝世间平衡的保持对多种细胞有机的发育与生命的保持至关重要,其失衡将导致各种疾病的产生.如:人类均匀每天有 6×10(10)个新细胞生成,一起又挨近平等数量的老练细胞被机体铲除.在细胞增殖及细胞凋亡间存在一种配对联系,因而区别活细胞和死细胞对研讨成长条件的操控和细胞逝世进程都是十分重要的。
D. 染色工作液:每 1 ml 的试验缓冲液(1X)中,参加 1ul活细胞-绿色染料(LiveDye)和1ul死细胞-赤色染料(NucleiDye),混合均匀(适用于2个样品孔,每孔0.5ml)。如有很多样品,请成份额的扩展染色工作液装备。
2. 关于贴壁细胞,在 24 孔板的盖玻片上栽培和培育细胞,在 CO2 细胞培育箱中 37°C 培育至少 24 小时。先用细胞刮刀或许胰酶-EDTA 消化细胞,之后离心搜集细胞(1000 rpm,3 min)。
6. 将盖玻片掩盖到载玻片上,入睡运用恰当的滤光片经过荧光显微镜剖析细胞。
关于一切的处理和未处理的细胞样本,主张把未染色的对照组细胞悬浮在试验缓冲液(不含有LiveDye和NucleiDye),用于流式细胞剖析;
2. 关于非贴壁细胞,搜集 1-5 ×105 个细胞离心 (4℃, 300g, 5 min),用预冷的 PBS 洗刷2 次,弃去 PBS。关于贴壁细胞,先用胰蛋白酶(不含 EDTA)消化细胞,然后离心去上清。
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