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四环素类ELISA检测验剂盒酶联免疫实验过程
发表时间: 2024-10-11 07:23:28 作者: 行业新闻
选用直接竞赛ELISA办法查验测验安排、蜂蜜、鸡蛋、尿样等样本中的四环素类药物(Tetracyclines,),试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶符号物、抗体、规范品及其他配套试剂组成。检测时,参加规范品或样品溶液,样本中的四环素类药物和酶标板上预包被偶联抗原竞赛抗四环素类药物抗体,参加酶符号物后,用TMB底物显色,样本吸光度值与其所含四环素类药物含量成负相关,与规范曲线比较即可得出样本中四环素类药物的残留量。
将所需试剂从4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上, 洗刷液冷藏时或许会有结晶需康复到室温以充沛溶解,每种液体试剂运用前均须摇匀。取出需求数量的微孔板及结构,将不必的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
规范液6:取1.0ppm高浓度规范品溶液73ul参加装有2.93ml 复溶液24.3ppb的瓶中,盖紧,混匀,浓度即为24.3ppb。
规范液5:取1ml规范液6参加装有2ml 复溶液8.1ppb的瓶中,盖紧,混匀,浓度即为8.1ppb。
规范液4:取1ml规范液5参加装有2ml 复溶液2.7ppb的瓶中,盖紧,混匀,浓度即为2.7ppb。
规范液3:取1ml规范液4参加装有2ml 复溶液0.9ppb的瓶中,盖紧,混匀,浓度即为0.9ppb。
规范液2:取1ml规范液3参加装有2ml 复溶液0.3ppb的瓶中,盖紧,混匀,浓度即为0.3ppb。
1编 号:将样本和规范品对应微孔按序编号,每个样本和规范品做2孔平行,并记载规范孔和样本孔地点的方位。
2加样反响:加规范品使用液或样本50µl/孔到各自的微孔中,然后加抗体作业液50µl/孔,悄悄振动5秒混匀,37℃避光反响30分钟。
3洗 涤:当心揭开盖板膜,甩去孔内液体,每孔加350ul作业洗刷液,静置30秒后弃去,重复洗刷5次,最终一次拍干。(用吸水纸拍干,拍干后未被铲除的气泡可用洁净的枪头刺破)。
6显 色:加底物液A 50µl/孔,再加底物液B 50µl/孔,悄悄振动5秒混匀,37℃避光显色15分钟(若蓝色过浅,可适当延伸反响时间)。
8测吸光值:用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值(主张用双波长450/630nm)。测定应在停止反响后10分钟内完结。回来搜狐,检查更加多
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