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瑞氏染色 _

发表时间: 2024-11-29 03:09:45 作者: 行业新闻

  A 原因 染液与缓冲液混合不均;冲刷前已将染液、缓冲液倾去;染色液未过滤;或天热单调时,染液中甲醇蒸发。

  2、缓冲液 由1%的磷酸氢二钠和1%的磷酸二氢钾各30毫升加蒸馏水1000毫升配成,或以上两药各1克加2500毫升左右蒸馏水制成。以石蕊试纸查验、调整酸碱度,使PH在6.5-7之间即可。

  缓冲液亦可永新鲜蒸馏水或煮沸后密闭保存的蒸馏水。如蒸馏水与空气过多触摸,那么可因吸收空气中之二氧化碳而使PH值变低,影响染色,故不宜运用。

  4 自缓冲液滴入10-15分钟后,用自来水冲刷。冲刷时应将玻片相等,以流水滴入使染液及缓冲液自玻片边际溢出,染料沉积即随水浮去。冲刷时,切忌水力过大,避免将标本并染液一起冲走;冲刷前切不行先将染液倾去,否那么沉积将附于标本上不能除掉,染色时刻与染液的性质、酸碱度、气温等联系甚大,因而应灵敏把握。最好先冲刷一张,于低倍镜下开始查看,如细胞核浆清楚,颗粒清楚,表明染色满足,此刻,始可将其他涂片悉数冲刷。如染色过浅,那么需延伸染色时刻。

  瑞氏试剂中之酸性伊红和碱性美篮混合经化学作用后,变成中性之 伊红化美蓝,久置后,经氧化而含有天青。此三种染料别离和细胞核及浆中的NH3和COO-等结合,使细胞核及胞浆上色。因为系中性染料,又有缓冲液调理酸碱度,所以细胞受染后,蓝红等色彩都较适中,核染质、胞浆及其间之颗粒显色较为清楚。

  A 体现 红细胞呈蓝色或绿色,细胞核、细胞浆及颗粒染色深,结构不清。酸性颗粒亦蓝染,淋巴细胞呈灰色。

  B 原因 底子与染色过深之原理相同,玻璃片偏碱、冲刷时刻缺少亦为或许之原因。

  5 冲刷、待干、镜检 。如天冷或空气中水分含量大,可用吸水纸吸水加速单调速度。但切忌用力重压或擦洗,避免将标本中的细胞成分擦去或损坏。

  4优缺点 其首要长处是染色办法简略、省时、易于推行,且染色较明晰,特别是胞浆及其间颗粒受染杰出。按照咱们的领会,在细胞学查看中,除个别状况外,瑞氏染色底子上能解决绝大部分常见病的确诊问题。其缺少之处是核染质及核膜的结构往往不如巴氏染色清楚。

  A 体现镜下细胞变小,核与浆均呈深蓝或蓝黑色、结构不清,红细胞呈碱性色。

  B 原因 染色时刻过长;染液过多或缓冲液过少;染液或缓冲液偏碱;夏日染色过程中甲醇蒸发。

  C 纠正 用甲醇脱色后重复染色。亦可用甲醇或瑞氏染液脱色数秒后冲刷,再行镜检,脱色时刻根据详细状况决议。

  1将已编号之涂片水平置于染色板或许染色架上,涂片两头各划一道蜡笔线,首要避免染液外溢。

  2 滴加瑞氏染色液。 其多少依标本所占面积巨细而定,一般为4-8滴,至染液将标本彻底盖住停止。染液不宜过少,否那么,甲醛蒸发后,易发生沉积;不行过多,避免因过盛而丢失,影响染色。

  3 1-2分钟后,滴入缓冲液〔染液与缓冲液的份额约为1:1.5,冬天1:1,夏日1:2〕。以气囊向玻璃片上悄悄鼓劲,使染液和缓冲液混合均匀,一般不宜口吹起,避免呼出二氧化碳改动缓冲液酸碱度而影响染色。

  C 纠正 如染色过碱,可于其间加1%醋酸少量,或将涂片浸于95%酒精数秒中,然后冲刷。

  B 原因 染料放置过久或与空气触摸后甲醛氧化而成甲酸;玻片或缓冲液偏酸。

  C 纠正 新旧染液混合运用,借以调整其PH值,或于染液中加1%碳酸钠适量。

  1、瑞氏试剂 瑞氏染料〔粉〕1克,加不含醋酮之甲醇600毫升溶解过滤后即成。混合方法可将瑞氏染料置于研钵内,加适量甲醇混合研磨,使染料溶解,将已溶解的液体倒入清洁玻瓶,再放入甲醇持续溶解剩余染料,直至染料及甲醇均用完停止,然后过滤,以深色中性之玻璃瓶贮藏待用。亦可将1克染料一次参与600毫升甲醇中,盛深色玻璃瓶内,塞好瓶口,置于温暖而漆黑之处或37度温箱内,每日振动5min,接连7天以上,然后过滤贮藏用。染液宜久置后运用,一般寄存愈久,染色作用愈好。