南京森贝伽生物ELISA试剂盒*，质量优，价格实惠，是您生物实验的，如有需要可与我司销售人员。

  本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中大鼠尿素氮(BUN)的含量。

  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠尿素氮(BUN)水平。用纯化的大鼠尿素氮(BUN)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入尿素氮(BUN)，再与HRP标记的尿素氮(BUN)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的尿素氮(BUN)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠尿素氮(BUN)浓度。

  1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

  2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

  3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

  4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

  5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍就保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

  6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上做试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

  7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

  标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在*、第二孔中分别加标准品100

  l分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50

  l，浓度分别为2400pmol/L，1600pmol/L，800pmol/L，400pmol/L，200pmol/L）。

  加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、

  l（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，

  配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

  试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

  各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

  请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后

  凡本网注明“来源：化工仪器网”的全部作品，均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品，未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的，应在授权范围内使用，并注明“来源：化工仪器网”。违反上述声明者，本网将追究其有关规定法律责任。

  本网转载并注明自其他来源（非化工仪器网）的作品，目的是传递更加多信息，并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责，不承担此类作品侵犯权利的行为的直接责任及连带责任。别的媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品第一来源，并自负版权等法律责任。

  如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起一周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。