“目前国内还没有商品化的、专门用于诊断检测血清4型禽腺病毒抗体的技术。国外虽然有，但特异性并不好，咱们开发的这样的产品特异性测出来是非常好的。”说起自己实验室与天之泰生物技术研究院（珠海）有限公司合作开发的ELISA检测试剂盒，国务院特殊津贴专家、扬州市先进工作者、扬州大学兽医学院教授叶建强充满自豪。作为扬州市劳模工匠技术服务队的一员，他将自己的科研成果转化为市场应用，帮企业研发检测技术和疫苗，解决了研发过程中的种种难题。

  高致病性的血清4型禽腺病毒（FAdV-4），是家禽心包积液-肝炎综合征（HHS）的病原体。2015年以来，该病在我国家禽密集养殖地区大范围暴发，给养鸡业造成了严重的经济损失，已成为危害我国养殖业健康发展的重要家禽新发传染病。因此，针对该病的免疫防控，包括诊断以及新型疫苗等关键技术探讨研究，已被纳入国家“十四五”重点研发项目“动物疫病综合防控关键研发技术与应用”专项。

  从2015年开始，叶建强就选择了当时国内研究还很缺乏的FAdV-4作为课题。通过多年研究积累，他针对该病的分子流行、致病机制、诊断检测及疫苗开发等发表了多篇学术论文。

  去年，天之泰公司找到叶建强。作为一家专门做动物疾病诊断试剂的企业，他们对叶教授研发的FAdV-4抗体ELISA检测技术非常感兴趣。因此，他们选择与叶建强实验室合作，联合研制国内首款商品化的FAdV-4抗体检测ELISA试剂盒。

  “针对这个病，国内已经有了几款灭活疫苗，但快速评估疫苗免疫效果的商品化检测技术却没有。”为了开发检测技术，叶建强实验室前期做了大量工作，通过蛋白表达、纯化等技术，研发了多个检测用靶标，构建了相应的检测技术。

  但在临床检测中，一些样品存在较高的背景反应，影响了检测结果准确性。针对该问题，叶建强实验室对开发的ELISA试剂盒里的条件一一进行确认、优化，并通过改进封闭液以及一抗稀释液等，降低了背景反应，提高了检测结果的特异性、可靠性。

  目前，优化后的ELISA试剂盒正在开展第三方比对实验，组织试剂盒申报工作，有望填补国内市场空白，为FAdV-4疫苗效果的评估提供快捷、可靠的工具。

  在FAdV-4的疫苗开发领域，叶建强实验室与国药集团扬州威克生物工程有限公司保持着长期的合作。2023年，二者合作研发的首创基于鸡肝细胞系悬浮培养技术的高效价FAdV-4灭活疫苗，获得了国家三类新兽药注册证书，并取得生产批文。目前，威克公司已投入生产了9个批次5亿羽份。

  “除了传统的灭活疫苗，其实我们还在跟他们一起研发多联多价的、更高效的重组基因工程疫苗。”依托于江苏省科技成果转化专项，叶建强实验室与威克公司合作开发了几款以禽腺病毒为载体，同时表达流感病毒等其他病原体保护性抗原的重组基因工程弱毒疫苗。

  “用血清4型禽腺病毒做载体，一方面能够防控FAdV-4自身，同时还可拿来防其他病原。重组基因工程弱毒疫苗扩增一次，相当于两种病原也都扩增了。传统多联疫苗则需要先分别扩增，再进行组合。因此，现在我们大家可以同时扩增，实现多联多价的高效防控策略。”叶建强介绍，除多联优势外，弱毒疫苗免疫保护效果也更好。“传统的灭活疫苗诱导体液以免疫为主，而构建的重组基因工程弱毒疫苗能同时激发机体的体液免疫与细胞免疫，保护性更加全面。”此外，相比于灭活疫苗，弱毒疫苗注射后可在体内继续扩增，因此效价无须太高，生产所带来的成本可大幅度降低。

  目前，利用重组基因工程，叶建强实验室已和威克公司联合研发出7种疫苗。实际研发过程中，他们发现不同病毒繁殖能力的差异，会导致获得疫苗的效价差异。针对该问题，实验室联合威克公司正通过细胞悬浮培养技术进行攻关。利用该技术，可提高疫苗效价，进一步降本增效。另外，叶建强实验室和威克公司联合研发的“新流腺”三联疫苗、“新支流腺法”五联疫苗等，在不久的未来有望投入实际生产中，为家禽重要病毒疫病防控保驾护航。

  叶建强实验室从几年前开始，就开展了鹅痛风病的相关研究。鹅痛风病是近几年高发的一种传染病，感染后雏鹅的死亡率可高达50%以上，对国内养鹅业造成了严重的经济损失。作为国内养鹅有突出贡献的公司，江苏立华牧业股份有限公司鹅年出栏量170多万只，但由于痛风病的流行，包括立华在内的整个养鹅行业都备受打击。

  针对行业问题，叶建强实验室做了技术攻关，包括利用鸡肝细胞分离鉴定病原、相应特异性单克隆抗体的研制等，构建了系列鹅痛风病的检测技术，并在2023年11月向立华提供了鹅痛风病防治的技术服务，包括提供用于分离病原的细胞、特异性单克隆抗体以及用于中和抗体检测的免疫荧光技术。

  “通过免疫荧光技术，一个是可以检测鹅有没有被感染上，及时分离病原；另一个是可以测定鹅群中是不是真的存在中和抗体。有了这个工具，就可以及时进行疾病防控了。”叶建强介绍。目前，立华公司已能实现对鹅痛风病的及时防控，2024年鹅上市率将有较大提高，实现盈利，走出鹅痛风病的阴霾。

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