(一)常规染色脱色方法 1、 PAGE 电泳结束后取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中， 确保染色液可以充分覆盖凝胶。 2、置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色 1 小时或更长时间。具体的染色时间取 决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚，温度较低，则染色时间宜适当延长。凝胶较 薄，温度比较高，则染色时间能适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接 近，在染色液中几乎看不清凝胶时，可以认为已染色充分。染色小时或更长时间不会对最 终的染色效果产生负面影响。 3、倒出染色液。染色液能回收重复使用次。 4、加入适量脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶。Leagene 推荐脱色液的配方是：40% 乙醇，10%乙酸，50％蒸馏水。 5、置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色。期间更换脱色液 2～4 次，直至蓝色 背景基本上全部被脱去，并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色 1～2h 后 即可出现。 6、完成脱色后把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如 需避免溶涨，可以把胶保存在含 20%甘油水溶液中，长期保存可以制备干胶。 (二)快速染色脱色方法 1、PAGE 电泳结束后取胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸 腾，立马停止加热。 2、随后在染色液温度比较高的情况下，在室温摇床上摇动。 3、倒出染色液。染色液能回收重复使用 2～3 次。

  北京雷根生物技术有限公司 、加入适量脱色液，确保染色液可以充分覆盖凝胶。 5、微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾，立马停止加热。 6、随后在脱色液温度比较高的情况下，在摇床上摇动。此时通常可以观察到比较清楚的蛋白 条带。 8、完成脱色后，把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。 如需避免溶涨，可以把胶保存在含 20%甘油水溶液中，长期保存可以制备干胶。

  考马斯亮蓝染色液(Commassie Blue Staining Solution) 是以考马斯亮蓝 R250 为染 料可用于 SDS-PAGE 或非变性 PAGE 等蛋白电泳胶的常规染色或 Western 转膜后 PAGE 胶上残余蛋白的检测。采用常规染色方法需至少 1h，采用快速染色方法一般数分钟即可。 本染色液经过改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性气味的乙酸。

  1、染色时，如果把凝胶和染色液一起放置在微波炉中适当加热，可以大幅度加快染色速度。 但加热时宜尽可能的避免沸腾，以免出现因暴沸而导致的凝胶碎裂。 2、 脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸， 可以使部分染料吸附在吸水纸上， 加快脱色。 脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。 3、如果希望染色的背景更低，希望获得更加清晰的蛋白条带，能加入适量的室温蒸馏水 进行洗涤。通过蒸馏水洗涤能更加进一步降低背景。 4、常规染色脱色方法耗时较长，但检验测试灵敏度更高，染色效果更稳定 5、为பைடு நூலகம்您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。