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细胞培育:台盼蓝染色和AOPI染色剖析细胞活率的正确打开方法
发表时间: 2024-12-29 11:25:59 作者: 产品中心
在细胞培育过程中,了解细胞的活率关于评价细胞健康状况、优化培育条件以及进行药物挑选等试验至关重要。细胞活率的剖析办法最重要的包括镜检法(如血球计数板)、图画剖析法、电阻抗法、流式细胞术等,
最常用的办法是图画剖析法,图画剖析法能主动摄影和数据剖析计算,习惯才能强,适用于简直一切类型细胞的检测,图画剖析中差异细胞死活的方法主要为台盼蓝染色和AOPI染色。
,对不同的细胞类型/生物工艺具有十分杰出的可拓展性与更精确的泛化才能,使得剖析成果愈加精确。
正常的活细胞,胞膜结构完好,可以排挤台盼蓝,使之不可以进入胞内;而损失活性或细胞膜不完好的细胞,胞膜的通透性添加,可被台盼蓝染成蓝色,一般以为细胞膜完好性损失,即可以为细胞现已逝世。因而,
AOPI试剂由AO(Acridine Orange,吖啶橙)和PI(Propidium iodide,碘化丙啶)组成。其间,AO是一种异染性荧光阳离子染料,可渗透细胞膜,并嵌入一切细胞(活细胞和死细胞)的细胞核,检测到绿色荧光。PI不能通过完好的细胞膜,只能进入死细胞的细胞膜,并嵌入死细胞的细胞核,检测到赤色荧光。当AO、PI试剂均存在于细胞中,在适宜的染料配比下,染料间会产生荧光共振能量转移,致活细胞被激宣布绿色荧光,死细胞被激宣布赤色荧光。
在传统的图画剖析法中,其成果是否精确高度依赖于试验人员是否严格遵守操作标准
在AOPI中,染色工作液的制造、细胞样本的处理及检测时的操作细节,任何一环的人为忽略都可能会影响细胞染色作用和终究的剖析成果。相同,在台盼蓝染色过程中,细胞悬液的制备、染料的制造与染色时刻以及细胞计数的精确性,均遭到人的要素的影响,从而影响细胞生机的评价。
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