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常用染色液的配方
发表时间: 2025-02-07 03:41:56 作者: 江南电竞app测评答案-染色液
配方:(1)苏丹III或苏丹Ⅳ干粉;95%酒精10ml;过滤后再参加10ml甘油
(2)先将苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中,再参加70%酒精50ml。
适用范围:适用于植物安排压片法和涂片法,染色体上色深,保存性好,运用2~3年不蜕变。山梨醇为助渗剂,兼有安稳染色液的作用,假设没有山梨醇也能染色,但作用较差。
⒌中性红(neutral red)溶液用于染细胞中的液泡,可判定细胞死活。
⒍曙红Y(伊红,eosin Y)酒精溶液常与苏木精对染,能使细胞质染成浅赤色,起衬染作用。
⒕苏木精(hematoxylin)染液苏木精是植物安排制片中运用最广的染料,是苏木科植物苏木的心材提取出来的。它是很强的细胞核染料,还能够分化出不一样的色彩。配方许多,现举海登汉氏(Heidenhains)苏木精染色液,又称铁矾苏木精染色液。
取碘2g和KI,先参加少数的75%乙醇拌和,待溶解后再用75%乙醇稀释至100mL
将固体的加拿大树胶块,溶解于二甲苯或正丁醇中,浓度要恰当(留意必定不能够混入水或酒精),是玻片标本好的封固剂。也可用人工合成的中性树胶替代。
⒒橘红G(orange G)酒精溶液为酸性染料,染细胞质,常作二重或三重染色用。
⒓番红(safranin O)为碱性染料,适用于染木化、角化、栓化的细胞壁,对细胞核中染色质、染色体和花粉外壁等都可染成艳丽的赤色。并能与固绿、苯胺兰等作两层染色,与橘红G、结晶紫作三重染色。
原液C:取原液B 55ml,参加6ml冰醋酸和6ml(38%的甲醛)。
染色液:取C液10~20ml,加45%冰醋酸80~90ml,再加山梨醇1~,配成10%~20%浓度的石炭酸品红液,放置两周后运用,作用十分显着(若立即用,则上色能力差)。
中液用作固定根尖、茎尖、小的子房和胚珠等,固定时刻12-24 h或更长。
强液适用于木质的根、茎和坚韧的叶子、老练的子房等。为了易于浸透,可在中液和强液中另参加2%的麦芽糖或尿素。固定时刻12-24 h或更长。
铬酸为三氧化铬的水溶液:(1) 10 ml铬酸;(2) 10 ml浓硝酸。
(3)95%乙醇:用于脱色,脱色后可选用以下(4)或(5)的其间一项复染即可。
(4)稀释石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱液(碱性复红1g,95%乙醇10mL,5%石炭酸90mL)10mL,加蒸馏水90mL。
(5)番红溶液:番红O(safranine O,又称沙黄O),95%乙醇100mL,溶解后可储存于密闭的棕色瓶中,用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。
⒐苯胺兰(aniline blue)溶液为酸性染料,对纤维素细胞壁、非染色质的结构、鞭毛等,尤其是染丝状藻类作用好。还多用于与真曙红作两层染色,关于高等植物多用于与番红作两层染色。
⒊1%醋酸洋红(aceto carmine)酸性染料,适用于压碎涂改制片,能使染色体染成深赤色,细胞质成浅赤色。
煮沸2h左右,并随时留意弥补参加蒸馏水到原含量,然后冷却过滤,参加4%铁明矾溶液1~2滴(不能多加,不然会产生沉积),放入棕色瓶中备用。
⒔固绿(fast green)又称快绿溶液。为酸性染料,能将细胞质,纤维素细胞壁染成艳丽绿色,上色很快,故要很好的把握上色时刻。
将绿溶于100ml蒸馏水,配成饱满水溶液。用时需稀释。稀释的倍数应视资料不同而异。
取克硫堇(也称劳氏青莲或劳氏紫)粉末,溶于100ml蒸馏水中,就能够运用。运用此液时,需要用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片,能成多色反响。
水溶性黑素10g,蒸馏水100mL,甲醛()。可用作荚膜的布景染色。
盐酸水解时刻对染色作用影响很大,水解时刻短,易上色但较难压片;水解时刻长,染色慢而色淡;超越20min或水解温度过高,往往染色极淡,或染不上色。许多资料最适宜的时刻有不同,一般来说,大染色体资料水解时刻可较长,小染色体资料宜短。
(1)结晶紫(cristal violet)液:结晶紫乙醇饱满液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸铵水溶液80mL。将两液混匀置24h后过滤即成。此液不易保存,如有沉积呈现,需从头制造。
(2)芦戈(Lugol)氏碘液:碘1g,KI 2g,蒸馏水300mL。先将KI溶于少数蒸馏水中,然后参加碘使之彻底溶解,再加蒸馏水至300mL,即成。配成后贮于棕色瓶内备用,如变为浅黄色能运用。
将上述两液等量混合均匀后再运用。适于对导管、管胞、纤维等木质化的安排进行解离时运用。
将浓盐酸、95%酒精等量混合备用,一般ห้องสมุดไป่ตู้于离析根尖细胞。
以上染色液合作运用,可区分出革兰氏染色阳性(G )或阴性(G- )细菌,前者蓝紫色,后者淡赤色。
22.齐氏(Ziehl)石炭酸复红液:碱性复红溶于95%乙醇10mL中为A液;溶液100mL为B液。混合A、B液即成。
(1)储存液:称取姬姆萨粉,甘油33mL,甲醇33mL。先将姬姆萨粉研细,再逐滴参加甘油,持续研磨,最终参加甲醇,在56℃放置1-24h后即可运用。
甘油1份+50%或70%酒精1份,适用于木材的软化,将木质化根、茎等资料扫除空气后浸入软化液中,时刻至少一周或更长一些,也可将资料保存于其间备用。
改用/L盐酸于60℃恒温下水解10~15min,对许多类型资料都能取得细胞别离和染色适宜的较好作用。
2.对二氯代苯饱满水溶液将对二氯代苯参加蒸馏水中拌和至不再溶解停止,即成饱满水溶液。
弱液用于固定较娇嫩的资料,例如藻类、真菌类、苔药植物和蕨类的原叶体等,固定时刻比较短,一般为数小时,最长可固定12-24 h,但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟到1h。
因为无水乙醇价格较高,故常用95%的酒精制造。制造办法很简洁,用95%的酒精加上必定量的蒸馏水即可。可按下列公式计算:
切片需先经甲液媒染,并充沛水洗后才能以乙液染色,染色后经水稍洗再用另一瓶甲液分色至适度。
铁矾苏木精染液为细胞学上染细胞核内染色质最好的染色剂,但要留意甲液与乙液在任何情况下决不能混合。
⒈碘-碘化钾(I2-KI)溶液能将淀粉染成蓝紫色,蛋白质染成黄色,也是植物安排化学测定的重要试剂。
先将碘化钾溶于少数蒸馏水中,待全溶解后再加碘,振动溶解后稀释至300mL,保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍,这样染色不致过深,作用更佳。
19.墨汁染色液国产绘图墨汁40mL,甘油2mL,液体石炭酸2mL。先将墨汁用多层纱布过滤,加甘油混匀后,水浴加热,再加石炭酸搅匀,冷却后备用。用作荚膜的布景染色。
混合A液和B液即成,用于细菌单染色,可长时刻保存。依据本身的需求可制造成稀释美蓝液,按1∶10或1∶100稀释均可。
也常用于95%酒精脱水时,参加少数曙红溶液,其意图是在包埋、切片、展片、镜检时便于辨认资料。
⒎钌红(ruthenium red)染液钌红是细胞胞间层专性染料,其配后不易保存,应现用现配。
⒏龙胆紫(gentian violet)为酸性染料,适用于细菌涂改制片。
制造过程:(1)将苏木精溶于酒精中,瓶口用双层纱布包扎,使其充沛氧化(一般在室内放置两个月后方可运用)。(2)参加蒸馏水,塞紧瓶口,置冰箱中可长时刻保存。
将和乙醇按7∶3混合,装入滴瓶备用。用于擦洗显微镜镜头上油迹和尘垢等(留意瓶口有必要塞紧,避免蒸腾)。
(38%甲醛)5ml+冰乙酸5ml+70%酒精90 ml,可用于固定植物的一般安排,但不适用于单细胞及丝状藻类。稚嫩资料用50%酒精替代70%酒精,可防止资料缩短;还可参加5ml甘油(丙三醇)以防蒸腾和资料变硬。FAA可兼作保存剂。
5ml+丙酸5ml+70%酒精90ml,用于固定一般的植物资料,一般固定24h,作用比FAA好,并可长时刻保存。
是研讨植物细胞分裂和染色的优秀固定液,资料固定后,用95%和85%的酒精浸洗,清洗2-3次,也可转入70%酒精中保存备用。
(2)运用液(临用时制造):取1mL储存液加19mLpH7.4磷酸缓冲液即成。也能够储存液∶甲醇=1∶4的份额制造成染色液。
称取瑞氏染色粉6g,放研钵内磨细,不断滴加甲醇(共600mL)并持续研磨使溶解。经过滤后染液须储存一年以上才可运用,保存时刻愈久,则染泽愈佳。
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