布鲁氏菌病（brucellosis，简称布病）又称“波状热”，是由布鲁氏菌（Brucella）感染从而引起的人畜共患传染病，传播途径主要是接触病畜的流产物、分泌物、排泄物及被污染的水、食物等，可经体表皮肤黏膜、消化道、呼吸道感染。现将—例布鲁氏菌血流感染的病例报道如下，并就该菌培养鉴定及治疗等方面内容做回顾，以供实验室及临床诊治参考。

  2024年05月27日，患者，女，60岁，反复颈、腰部疼痛3月余，来我院诊治，门诊拟腰椎间盘突出症”收入院。

  查体：T38.8℃，P98次/分，R20次/分，BP104/70mmHg，颈4/5、5/6椎间隙压痛，压头试验阴性，颈椎背伸、左侧弯可诱发疼痛加剧，伴放射至右上肢；腰4/5、5/S1椎间隙压痛。腰椎活动痛性受限，背伸、左、右侧弯均可诱发腰痛。

  辅助检查：CT检查:颈椎、腰椎退行性改变；颈3/4、颈5/6椎间盘突出（后中央型）；颈5椎体向后Ⅰ度滑脱；腰4/5椎间盘膨隆并突出（后中央型）；腰1、2椎体压缩性骨折，建议MRI扫描除外新发骨折；腰4、5椎体骨质吸收破坏原因待查。

  实验室检查：5月28日血常规：白细胞4.66×10^9/L、中性粒细胞比率68.2%、红细胞3.02×10^12/L↓、血红蛋白85.00g/L↓、血小板计数249.00×10^9/L。C-反应蛋白：60.1mm/L↑、乙肝两对半、传染病三项、血脂、血同型半胱氨酸、心肌酶、随机血糖、肝肾功能、电解质、凝血功能未见明显异常。

  根据病史、体征及辅助检查，入院诊断：1、颈、腰部疼痛查因2、神经根型颈椎病3、腰1、2椎体压缩性骨折4、腰4、5椎体骨质吸收破坏查因？

  6月2日血培养瓶双瓶需氧瓶报告阳性，培养时间为2.58天，然而革兰染色涂片后镜下未见细菌？是报假阳性吗？

  1、剧烈的气温变化：实验室环境和温度剧烈变化造成血培养的生长曲线波动而导致的假阳性。

  2、供电电压：电压波动，会导致生长曲线、血培养瓶：血培养瓶过期，培养基底部变色。

  4、采血量：血液细胞本身代谢产生CO2，无菌血液在血培养瓶培养时也会产生本地曲线的变化，当采血量过多的时候可能会造成假阳性。

  排除电压波动及温度剧烈变化原因，采血量正常，白细胞总数未见升高，血培养假阳性可能性不高，那为什么革兰染色涂片后镜下未见细菌？结合患者有骨质吸收破坏现象，C-反应蛋白：60.1mm/L↑，并有反复发热，血培养2.58天报阳性，考虑布鲁氏菌可能性大。通过查阅文献，柯氏染色方法简单、快速，对布鲁氏菌的鉴定具有特异性高的优点[1]。

  出院医嘱：1、予多西环素0.1g/次2次/天 、利福平0.15g/次1次/天 口服，连续治疗3月以上；庆大霉素肌注1支、连续5天；2、每月复查肝肾功能1次，避免剧烈运动。

  （一）布鲁氏菌革兰染色呈阴性，且着色弱，导致血培养阳性，涂片不易找见菌体导致判断假阴性，柯兹洛夫斯基染色法(简称柯氏染色法) 是鉴定布鲁氏菌的经典染色方法之一，取培养物涂片，固定后进行柯氏染色，布鲁氏菌呈红色球杆状，其他细菌呈蓝色，可用于快速鉴别布鲁氏菌。[1]下面将柯氏染色法的原理及方法分享如下：

  柯氏染色法原理：布鲁氏菌对沙黄染料亲和力高，一旦上色就不容易被其他染液复染。因此柯氏染色法首先是采用沙黄染布鲁氏菌，然后再用亚甲基蓝作复染剂染其他细菌及细胞。布鲁氏菌染成红色，其他细菌及细胞染成复染剂所对应的颜色蓝色。

  在血培养涂片检查中，若未能发现细菌存在，不应仓促地判定为假阳性结果。鉴于血培养中有几率存在的布鲁氏菌为革兰阴性的细小杆菌，容易与血培养的背景混淆而不易区分，而酵母菌、马尔尼菲篮状菌等微生物，有时菌量相对较少，在涂片检查中不注意观察可能会引起漏检。因此，在判断血培养结果是否为假阳性时，需结合患者的其他临床检验测试的数据进行综合分析。

  布鲁氏菌病（brucellosis）是一种全球分布的人畜共患病，当布鲁氏菌侵及椎间盘或者椎体组织后导致布鲁氏菌性脊柱炎（Brucella spondylitis，BS），是布鲁氏菌病最常见和最严重的并发症之一，而其中又以腰椎最常见，即腰椎布鲁氏菌性脊柱炎[2]。脊柱炎、骶髂关节炎。若复发感染，脊椎不稳定，显著的脊椎后突，引起难以控制的疼痛，形成局灶脓肿经抗菌治疗无缓解等情况时建议外科手术。[3]

  布鲁氏菌生长缓慢，血培养涂片革兰染色着色弱不易辨认，基层医院因实验条件限制常出现漏诊或误诊。本文作者能先看血培养的生长曲线排除了常见血培养假阳性，并通过病人的临床症状高度怀疑布鲁氏菌，选择了特异性更强的柯氏染色，且能在检验判定的过程中做好相关的防护，保证了实验室生物安全，最后通过流行病史、形态学及快速脲酶试验确诊为布鲁氏菌。作者正是有了相关专业相关知识的储备，才能在有限的条件对少见菌进行正确的鉴定。

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