先将结晶紫溶于酒精，草酸铵溶于蒸馏水中，然后将两液混合，静置４８小时运用。此染液安稳，置密闭的棕色瓶中可储存数月。

  先将碘与碘化钾混合，加水少量，略加摇摆，待碘彻底溶解后再加蒸馏水至定量。

  细菌经结晶紫染色，并用碘液媒染后，用95％酒精脱色，最后用番红液复染，假使细菌经结晶紫、碘液染色后不被酒精脱色，仍坚持紫兰色彩，则为革兰氏染色阳性；假如细菌被酒精脱色，则可被番红液复染成赤色，乃为革兰氏染色阴性。此染色法将细菌分为两大类，可以在必定程度上协助辨别细菌及医治时挑选恰当的抗菌药物。

  3．脱色：滴加95％酒精，并一再摇摆玻片，至无紫色脱出停止（约20秒），水洗。