80%无水乙醇 冰醋酸 无水氯化钙 蒸镏水 * 不同的试剂所起的效果不同

  * 分解（differentiation）： * 苏木色精染液为细胞核染料，与细胞核结实结合而使细胞核上色。 * 安排切片经苏木色精染色后，细胞核染色过度会过染（深染），细 胞核以外的细胞质、胶原纤维等也附有少数苏木色精染料而上色。 * 用某些特定的溶液把过染的胞核和不该上色的安排成分脱色，然后

  细胞核蓝色，细胞质、肌纤维，胶原纤维、红细胞 、甲状腺 胶质等呈深浅不同的赤色。

  安排和细胞经过苏木精曙红（HE）染色后，细胞核被染成蓝色， 胞质被染成赤色，纤维、肌肉和红细胞等呈深浅不同的赤色。 HE染色要艳丽，细胞核蓝染适中，染色质明晰可见，红蓝清楚， 比照明晰，无偏蓝或偏红的现象，才利于显微镜下调查。

  * 常用返蓝液的制造： ① Scott促蓝液 碳酸氢钠 无水硫酸镁 蒸馏水 麝香草酚 ② 氢氧化铵水溶液 氢氧化铵 蒸馏水 ③ 碳酸锂水溶液 碳酸锂 蒸馏水

  曙红Y（带负电荷） 以离子键的方式结合 安排内的物质 （带正电荷） 安排上色

  需常常过滤，加冰醋酸的量要恰当。 * 醇溶曙红染液染色后不必水洗，可直接经乙醇脱水、二甲苯通明

  * 氯化钙－曙红Y染液因氯化钙水溶液呈弱酸性（pH 5～6）,因而不 需求添加冰醋酸，染色艳丽，但要留意避开产生沉积。

  * 曙红是由荧光素衍生而来，主要有2种： 1. 水溶性曙红Y（eosin Y，water soluble）, 也称曙红钠盐、 黄光曙红或四溴荧光素钠，易溶于水，微溶于乙醇

  * 苏木色精（Hematoxylin）：又称苏木素，苏木精 * 无色或淡黄色粉末（若存放过久，触摸光和空气，色彩可渐渐加深），

  * 有无水和含3H2O两种，易溶于热水和热乙醇、乙二醇和甘油，微溶于水；

  * 它自身不是一种染料（只要助色团羟基），没有染色功能，需求经过氧化 后成 为氧化苏木精（苏木红）后，既有助色团羟基,又有发色团醌式，才有染

  从赤色又康复为蓝色的进程，称为蓝化。 * 蓝化机制： 这种蓝→红→蓝变色的现象，是苏木红和铝离子所构成的蓝 淀的结合、解离和再结合的进程。 一般来说，蓝淀在酸性环境中，处于离子状况，呈赤色，这 种现象称为色淀解离。相反，离子状况的红淀，在中性或碱

  • • • 梁英杰 中山大学隶属榜首医院病理科 中山大学中山医学院病理学教研室

  * 苏木色精（hematoxylin）和曙红（eosin）两种染料的联合染 色，简称HE染色。 * 是病理学制片技能最基本和最常用的染色办法。 * HE染色可将胞核染成蓝色，将细胞质、胶原纤维和肌纤维、 红细胞等染成深浅不同的赤色。

  1．白腊切片惯例脱蜡至水，蒸馏水稍洗。 2. 改进Lillie-Mayer苏木精染液染色 3．流水冲刷 4．1％盐酸乙醇 5．流水冲刷 6. 0.5％曙红水溶液染色 7. 流水冲刷 8．惯例脱水通明，中性树胶封片。 * 手艺染色与仪器主动染色。

  * 苏木色精归于--天然染料（依据染料的来历） --酸性染料（依据染料中所含助色团的性质）

  * 制造苏木色精染色液所用的试剂： 苏木色精 无水乙醇，乙二醇----溶剂，溶解苏木色精，并可按捺霉菌的成长。 硫酸铝钾，硫酸铝铵 ，硫酸铝---媒染剂，(Al3∽苏木红) 氧化汞，碘酸钠，碘酸钾----氧化剂----人工氧化 丙三醇---稳定剂，防止苏木色精过度氧化。 冰醋酸，柠檬酸---平衡氧化剂的氧化效果，添加细胞核挑选性染色。 水合氯醛---保护剂效果 蒸镏水 * 不同的试剂所起的效果不同

  * 曙红染色机制还不彻底清晰。 * 水溶性曙红Y含有一个醌型苯环的发色团和两个构成钠盐的酸

  * 分解：这种挑选性地脱除非目的物染色的进程 分解液：分解所运用的特定溶液。

  0.5％～1％盐酸-乙醇 盐酸 0.5～1.0ml 70％乙醇 99.5～99ml * 分解时刻为2s～5s。 * 分解机制： 安排着染苏木色精后经盐酸-乙醇分解，在酸性环境有许多H＋ ， 使安排外表的电荷产生改动，之前染色所构成的色淀解离，与组 织结合的染料便渐渐脱下来。

  * 安排切片自身是无色的，在镜下难以区分安排和细胞的结构，更无法观 察其细小的形状改动，因而就需求对安排切片进行染色后才能在显微镜下 调查安排和细胞的结构。 * 染色（staining）：用不同的染料着染安排细胞，安排细胞内的各种成分 与染料经过化学结合或物理吸附效果而显示出不同的色彩，然后可以通 过显微镜被调查到。 * HE染色主要是运用苏木色精与曙红染料经过化学结合或物理吸附效果， 苏木色精着染细胞核呈蓝色，曙红着染胞质，纤维和肌肉等成分呈不同 深度的赤色。

  * 曙红（eosin）：又称伊红，为桃赤色或粉赤色的粉末。 * 曙红归于 ---人工合成染料（依据染料的来历） ---酸性染料（依据染料中所含助色团的性质） * 曙红分为：曙红Y，Y是带黄色之意，与蓝色的苏木精比照染色好。 曙红B，略带蓝色，与蓝色的苏木精比照染色不抱负。 * HE染色选用曙红Y而不必曙红B。

  * 苏木色精的染色是经过制造成苏木色精染色液来完成。 * 苏木色精染液的染色机制还不彻底清晰。 * 苏木色精染液中的苏木红的从结构式看，其助色团为羟基，是一种 酸性染料,但因为酸性助色团羟基的酸性很弱,对安排的亲和力较小。 铝离子

  改进Lillie-Mayer苏木色精染液 染液特色： * 染液无氧化膜构成，可运用较长时刻，细胞核染色质着染较深 而详尽。 * 新配好的染液染色时刻约5min～8min，运用一周后苏木色精染 液进一步老练，染色时刻约为3min～5min即可，因而染液最好 提早3～5天制造。因为不需求每天用前除掉氧化膜，很合适 用在染色机染色。