革兰氏染色使用(原理办法进程优缺陷)

发表时间: 2025-04-13 06:42:34 作者: 稀释液

  革兰氏染色是一种差异染色办法,用于依据细菌细胞壁的特性将细菌分为两组(革兰氏阳性和革兰氏阴性)之一。它也被称为革兰氏染色法或革兰氏法。该程序是以创造该技术的丹麦细菌学家汉斯克里斯蒂安格拉姆命名的。

  革兰氏染色办法根据某一些细菌细胞壁中肽聚糖之间的反响。革兰氏染色包含给:细菌染色,用染剂固定色彩,使细胞脱色,并进行复染。

  a. 结晶紫与肽聚糖结合,将细胞染成紫色。革兰氏阳性细胞和革兰氏阴性细胞的细胞壁中都含有肽聚糖,所以开始,一切细菌都会染成紫色。

  c. 用酒精或丙酮使细胞脱色。革兰氏阴性细菌的细胞壁中的肽聚糖要少得多,因而这一进程基本上使其无色,而革兰氏阳性细胞中只要一些色彩被去除,这些细胞含有更多的肽聚糖(细胞壁的60-90%)。革兰氏阳性细胞的厚细胞壁在脱色进程中脱水,导致细胞缩短,并将染色碘复合物滞留在细胞内。

  4. 脱色进程后,使用复染(一般是藏红,但有时是紫赤色)将细菌染成粉赤色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都会染上粉赤色的污渍,但在革兰氏阳菌的深紫色上看不到。假如正确履行染色程序,革兰氏阳性菌将为紫色,而革兰氏阴性菌将为粉赤色。3. 革兰氏染色技术的意图

  用光学显微镜调查革兰氏染色的成果。因为细菌是有色的,因而不光可以确认它们的革兰氏染色组,还可以调查到它们的形状、巨细和集合形式。这使得革兰氏染色关于医疗诊所或实验室来说是一种有价值的确诊东西。尽管染色或许没办法清晰辨认细菌,但一般知道它们是革兰氏阳性仍是革兰氏阴性就足以开有用抗生素的处方。4. 革兰氏染色技术的缺陷

  有些细菌或许是gram-variable or gram-indeterminate。但是,即便这一些信息也或许有助于缩小细菌的规模。当培育物不到24小不时,该技术最牢靠。尽管它可以适用于肉汤培育(但最好先离心处理)。该技术的首要局限性是,假如在该技术中犯错,则会发生过错的成果。要发生牢靠的成果,需求实践经验和技术。此外,传染源或许不是细菌。真核病原体染色为革兰氏阴性。但是,除真菌(包含酵母)外,大多数真核细胞在这样的一个进程中都无法粘附在载玻片上。5. 革兰氏染色所需资料

  a. 将一小滴细菌样本放在载玻片上。将细菌经过本生灯的火焰加热三次,将细菌固定在载玻片上。加热过多或时刻过长会消融细菌细胞壁、歪曲其形状,导致成果不精确。假如加热太少,细菌会在染色进程中从载玻片上洗掉。

  b. 用滴管将原色(结晶紫)涂在载玻片上,让其静置1分钟。用不超越5秒钟的水悄悄冲刷载玻片,以去除剩余的污渍。冲刷时刻过长或许会去除太多色彩,而冲刷时刻不行长或许会使革兰阴性细胞上残留太多污渍。

  c. 用滴管将革兰氏碘涂在载玻片上,将结晶紫固定在细胞壁上。让它静置1分钟。

  d. 用酒精或丙酮冲刷载玻片约3秒钟,然后当即用水悄悄冲刷。革兰氏阴性细胞将失掉色彩,而革兰氏阳性细胞将坚持紫色或蓝色。但是,假如脱色剂翻开时刻过长,一切细胞都会失掉色彩!

  e. 涂上第二层着色剂藏红花,静置1分钟。用水悄悄冲刷,冲刷时刻不允许超出5秒。革兰氏阴性细胞应染成赤色或粉赤色,而革兰氏阳性细胞仍将出现紫色或蓝色。