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流式常用试剂制造
发表时间: 2025-03-15 20:07:57 作者: 稀释液
4)相同为小分子染料,很合适需小分子染料的流式细胞术,荧光强度低于APC。
3)其荧光消灭性强,不适用于传统的荧光显微镜技能,但适用于激光共聚焦显微镜技能。
4)可与FITC、PE调配,与FITC无光谱堆叠,与APC调配荧光搅扰小,补偿小,是比较抱负的调配。
7、流式细胞抗体稀释剂:L PBS液(PH)+1%BSA+%Na2N3。
10、PI染液(保存液,10×,用于细胞周期和凋亡检测):10mg PI溶于10ml PBS,参加2mg无DNA酶的RNA酶,4度保存备用。应用时,10倍稀释,每管加~PI染液。
3)可适用于小功率激光器的流式细胞仪,也可运用于大功率激光器的大流式细胞仪。
3)可适用于小功率激光器的流式细胞仪,也可运用于大功率激光器的大流式细胞仪。
2)在BD细胞仪的FL4通道检测,在Beckman Coulter细胞仪只要装备双激光器的FC500才干检测到。
1、10%NaN3:将10gNaN3溶解于100ml蒸馏水中,室温保存;活体试验或在辣根过氧化酶反响中可不运用NaN3。
1、激活剂PMA:用DMSO制造成ml,分装20ul/管,-20度保存。勿重复融冻。试验时用无菌、无叠氮钠PBS 1:100稀释贮存液,终浓度为20ng/ml。
2、激活剂离子霉素:用乙醇制造成浓度为ml的贮存液,-20度保存。试验时用无菌、无叠氮钠PBS 1:10稀释贮存液,终浓度为1ug/ml。
2)可适用于小功率激光器的流式细胞仪,也可运用于大功率激光器的大流式细胞仪。
4、CD3:包被在培育板中,在蛋白转运抑制剂存鄙人活化未稀释的血液细胞。
5、CD28:加快不同刺激剂(包含SEB、CD3等)的活化效应,浓度一般为10ug/ml。
A液xml(参照下表)中,参加B液yml,为L的PB。若再加蒸馏水至200ml,则成L PB。
4)可与FITC、PE、APC调配,荧光搅扰小、补偿小,是APC比较抱负的调配。
混合后,分装于200ml小瓶中,高压灭菌。临用前用无菌的%NaHCO3调PH至~。
2)可于FITC、PE调配,荧光光谱堆叠少,对随细胞的特异性结合少,但量子产值较低,适用于较高表达物的检测。
4、4%多聚甲醛:在磁力拌和下,将4g多聚甲醛溶于100ml PBS,参加数滴NaOH,在通风柜中于60度加热,使其溶解,调整PH至,运用前新鲜制造。
5、消化液:%胰蛋白酶(用培育液或PBS制造)或%胰蛋白酶与%EDTA的混合液。
6、红细胞裂解液:NH4Cl,KHCO3,EDTA?2Na,溶于100ml水中,调PH至,弥补蒸馏水至500ml,4度贮存,运用时需康复至室温。
6、阻断剂Bregeldin A:用DMSO制造成浓度为5mg/ml的贮存液,分装20ul/管,-20度保存。勿重复融冻。试验时用无菌、无叠氮钠PBS 1:10稀释贮存液,在激活进程最终4~5小时运用BFA,终浓度为10ug/ml。
7、阻断剂莫能菌素:用DMSO制造成浓度为1mg/ml的贮存液,4℃贮存至少4个月,试验时用无菌、无叠氮钠PBS 1:10稀释贮存液,终浓度为2umol/L。
11、Hanks液的制造(BSS,大多数都用在培育液、稀释剂和细胞清洗液,不能独自作为细胞、安排培育液)
2)%酚红溶液:取酚红置玻璃研钵中,逐滴参加NaOH并研磨,直至彻底溶解,约参加NaOH 10ml。将溶解的酚红吸入100ml量瓶中,用双蒸水洗下研钵中残留的酚红液,并入量瓶中,最终补加双蒸水至100ml。
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