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Western Blot高效制胶秘籍:新手必知要害
发表时间: 2025-01-04 08:52:01 作者: 稀释液
用自来水浸泡5分钟,洗洁精清洗,分外的留意沟槽的清洁。清洗后用纯水冲刷,37度烘干或吹干。
严厉依照试验要求制造别离胶和浓缩胶,文字供词浓度精确,特别是丙烯酰胺的份额,一旦误差会影响蛋白质的别离作用。
TEMED和APS是制胶的要害成分,留意它们的保存期限,运用前现配,文字供词它们的新鲜度来文字供词胶的聚合作用。
制胶时,特别是参加TEMED和APS后,需求敏捷操作,由于这两者会加快凝胶的聚合反应,推迟或许会引起胶体不均匀。别离胶灌胶后用酒精压平。
浇胶过程中,当心气泡的发生,尤其在参加样品孔梳时。如果有气泡,可以用移液器悄悄吸走,文字供词胶体外表平坦。
不同分子量的蛋白质需求不同pH值的缓冲液,文字供词正确的pH值有助于进步蛋白质的分辨率。
Western Blot制胶尽管看似杂乱,但游刃有余,多练几回你就能找到最对自己最合适操作的节奏!
别离胶气泡或许是胶垫问题,浓缩胶气泡或许是梳子刺进不妥。运用实心胶垫或正确刺进梳子。
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