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瑞氏染液的原理及运用方法

发表时间: 2024-12-22 15:46:41 作者: 行业新闻

  瑞氏染液由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料,溶于甲醇,后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。伊红一般为钠盐,有色部分为阴离子。美蓝一般为氯盐,有色部分为阳离子。甲醇的效果:一是溶解美蓝和伊红,使其解离为有色美蓝正离子的和伊红负离子。后两者能够挑选性地吸附于血细胞内的不同成分而使其上色;二是固定细胞形状,加快染色反响,增强染色效果。

  瑞氏染色法使细胞上色既有化学亲和反响,又有物理吸附效果。瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料美蓝的氧化物(天青)组成,其深于甲醇后,解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。各种细胞因为所含化学成分不同,对染料的亲和力也不一样,因而,染色后各种细胞呈现出各自的染色特色。

  先称枯燥(事前放入温箱枯燥过夜)瑞氏染料放置乳钵内,用乳棒悄悄敲碎染料成粉末,再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末,加少量甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸内显“一面镜”光泽,而无染料粉粒冷静。再加较多量甲醇研磨呈一面镜亮光,静置顷刻,将上层液体倒入一清洁贮存瓶内(hao用甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重复数次,至乳钵内染料及甲醇用完停止,摇匀,密封瓶口。存室温暗处,贮存愈久,则染料溶解、分化就越好,一般贮存3个月以上为佳。

  3、加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水)悄悄晃动玻片, 与瑞氏染色液混匀,静置5分钟。

  1、PH对细胞染色有影响。因为细胞中各种蛋白均为两性电解质,所带电荷随溶液PH而定。对某一蛋白质而言,如环境PH2、未干透的血膜不能染色,不然染色时血膜易掉落。

  5、如血膜上有染料颗粒堆积,可加少量甲醇溶解,但需当即用水冲洗掉甲醇,避免脱色。

  6、染色过淡,能够复染。复染时应先加缓冲液,发明杰出的染色环境,然后加染液,或加染液与缓冲液的混合液,不可先加染液。

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