1.瑞氏染料 由酸性染料伊红（E-）和碱性染料亚甲蓝（M＋）组成。伊红一般为钠盐，有色部分为阴离子。亚甲蓝（又称美蓝）为四甲基硫堇染料，有对醌型和邻醌型两种结构。一般为氯盐，即氯化美蓝，有色部分为阳离子。美蓝简单氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料（即天青）。将适量伊红、美蓝溶解在甲醇中，即为瑞氏染料。甲醇的效果：一是溶解美蓝和伊红；二是固定细胞形状。

  2.染色原理 既有物理的吸附效果，又有化学的亲和效果。各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉赤色，称为嗜酸性物质；细胞白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状况与伊红和美蓝均可结合，染淡紫赤色，称为嗜中性物质；原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较稠密的蓝色；中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物质，染成红蓝色或灰赤色；完全老练红细胞，酸性物质完全消失后，染成粉赤色。

  3.pH值的影响：细胞各种成分均属蛋白质，因为蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液pH而定，在偏酸性环境中正电荷增多，易与伊红结合，红细胞和嗜酸性粒细胞染色偏红，细胞核呈淡蓝色或不染色；在偏碱性环境中负电荷增多，易与美蓝结合，一切细胞呈灰蓝色，颗粒呈深暗，嗜酸性颗粒呈暗褐，乃至棕黑色，中性颗粒偏粗，呈紫黑色。稀释染液必须用缓冲液，冲刷用水应近中性，否则可导致细胞染色反响呈色反常，形状难以辨认，乃至过错。